Chất chỉ thị oxy hóa khử

Xanh methylene được sử dụng rộng rãi như là một chất chỉ thị oxy hóa khử trong hóa học phân tích. Các dung dịch của chất này có màu xanh trong môi trường oxy hóa, nhưng sẽ trở nên không màu nếu tiếp xúc với chất khử. Các tính chất oxy hóa có thể được nhìn thấy trong một thí nghiệm cổ điển của động học hóa học trong hóa học nói chung, thí nghiệm "chai xanh". Thông thường, một dung dịch được làm từ glucose (dextrose), xanh methylene, và natri hiđroxit. Khi lắc chai, khí oxy trong bình oxy hóa xanh methylene, và dung dịch chuyển sang màu xanh lam. Sau đó, dextrose sẽ dần dần khử các phân tử xanh methylene, làm cho màu trong bình chứa nhạt dần đến khi không màu. Khi dextrose hòa tan được tiêu thụ hoàn toàn, dung dịch sẽ chuyển sang màu xanh lam trở lại. Tiềm năng giữa oxy hóa E0 'là +0.011 mV.[31]

Chất tạo peroxide

Xanh methylene cũng là một chất cảm quang được sử dụng để tạo ra oxy singlet khi tiếp xúc với cả oxy và ánh sáng. Nó được sử dụng trong lĩnh vực này để làm cho peroxide hữu cơ bằng một phản ứng Diels-Alder mà là quay cấm với oxy triplet ở điều kiện áp suất tiêu chuẩn.

Phân tích sulfide 

Sự hình thành màu xanh methylene sau khi phản ứng của hydro sulfide với dimethyl-p-phenylenediamine và Fe3+ ở pH 0,4 - 0,7 được sử dụng để xác định bằng phương pháp đo photometric sulfide trong khoảng 0,020 đến 1,50 mg / L (20 ppb đến 1,5 ppm). Thử nghiệm rất nhạy và màu xanh phát triển khi tiếp xúc của thuốc thử với H2S hòa tan trong 60 phút. Các bộ dụng cụ sẵn sàng sử dụng như bài kiểm tra sulfide quang phổ Spectroquant[32] tạo điều kiện thuận lợi cho việc phân tích. Thử nghiệm sulfide xanh methylene là một phương pháp thuận tiện thường được sử dụng trong vi sinh vật đất để nhanh chóng phát hiện ra trong nước sự hoạt động trao đổi chất của vi khuẩn sulfate (SRB). Cần lưu ý rằng trong bài kiểm tra này, màu xanh methylene là sản phẩm của phản ứng và không phải là một chất phản ứng.

Đôi khi được sử dụng để bổ sung một chất khử mạnh, như axit ascorbic, vào dung dịch chứa sulfide để ngăn chặn quá trình oxy hóa sulfide từ khí quyển trong khí quyển. Mặc dù chắc chắn là một sự đề phòng âm thanh cho việc xác định sulfide với điện cực chọn ion, tuy nhiên, nó có thể cản trở sự phát triển của màu xanh nếu màu xanh methylene tươi được hình thành cũng giảm, như được mô tả ở trên trong đoạn trên chỉ thị redox.

Kiểm tra nước 

Phản ứng màu trong dung dịch xanh methylene có tính axit có chứa chloroform có thể phát hiện chất hoạt động bề mặt anion trong mẫu nước. Một xét nghiệm như vậy được biết đến như là một xét nghiệm MBAS (xét nghiệm chất hoạt động xanh methylene). 

Tuy nhiên, xét nghiệm MBAS không thể phân biệt giữa chất hoạt động bề mặt cụ thể. Một số ví dụ về chất hoạt động bề mặt anion là cacboxylat, phosphat, sulfat và sulfonat.

Giá trị cốt liệu của xanh methylene  

Giá trị xanh methylene phản ánh lượng khoáng chất đất sét trong các mẫu tổng hợp.[33] Dung dịch xanh methylene được bổ sung liên tiếp vào hỗn hợp tinh chế đang được khuấy trong nước. Sự có mặt của dung dịch thuốc nhuộm miễn phí có thể được kiểm tra với vết bẩn trên giấy lọc.[34]

Nhuộm sinh học

Trong sinh học, xanh methylene được sử dụng làm chất nhuộm cho một số quy trình nhuộm khác nhau, như nhuộm Wright, nhuộm Jenner hay nhuộm Moeller. Vì nó là một kỹ thuật nhuộm tạm thời, nên màu xanh methylene cũng có thể được sử dụng để kiểm tra RNA hoặc DNA dưới kính hiển vi hoặc trong gel: ví dụ, một dung dịch màu xanh methylene có thể được sử dụng để nhuộm RNA trên các màng lai ở bắc blotting để xác minh lượng axit nucleic hiện diện. Mặc dù màu xanh methylene không nhạy như ethidium bromide, nó ít độc hơn và không xen vào trong chuỗi axit nucleic, do đó tránh can thiệp vào việc giữ axit nucleic trên các màng lai hoặc với quá trình lai.

Nó cũng có thể được sử dụng như là một chỉ thị để xác định xem các tế bào nhân chuẩn như nấm men có còn sống hay đã chết. Màu xanh methylene không nhuộm lên tế bào sống, tuy nhiên, các tế bào chết không thể làm giảm oxy hóa xanh methylene và các tế bào được nhuộm xanh. Xanh methylene có thể gây trở ngại cho sự hô hấp của nấm men khi nó lấy các ion hydro trong quá trình này.

Nuôi trồng thủy sản 

Xanh methylene được sử dụng trong nuôi trồng thủy sản và các cá thể cá nhiệt đới như là một phương pháp điều trị nhiễm nấm. Nó cũng có thể có hiệu quả trong điều trị cá bị nhiễm ich mặc dù sự kết hợp của xanh malachite và formaldehyde có hiệu quả hơn rất nhiều so với protozoa ký sinh trùng Ichthyophthirius multifiliis. Nó thường được sử dụng để bảo vệ trứng cá vừa được đặt từ bị nhiễm nấm hoặc vi khuẩn. Điều này rất hữu ích khi người yêu thích muốn nở trứng cá một cách nhân tạo. Xanh methylene cũng rất hiệu quả khi được sử dụng như là một phần của "bồn tắm cá thuốc" để điều trị amonia, nitrit và ngộ độc cyanide cũng như điều trị tại chỗ và nội bộ cho cá bị thương hoặc bị bệnh như là "phản ứng đầu tiên".[35]